亲爱的小伙伴们，对于多聚甲醛固定细胞要洗吗和流式-多聚甲醛，很多人可能不是很了解。因此，今天我将和大家分享一些关于多聚甲醛固定细胞要洗吗和流式-多聚甲醛的知识，希望能够帮助大家更好地理解这个话题。
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多聚甲醛固定细胞要洗吗
多聚甲醛固定细胞不需要洗。
细胞爬片就是让玻片浸在细胞培养基内，细胞在玻片上生长。主要用于组织学，免疫组织化学，冰冻切片，细胞涂片，原位杂交等。
可根据自己的需要，到染色时再将之切开，这样既保证了细胞均一性，又可同时做几个指标的染色剪裁成合适大小，置于6孔板、12孔板或24孔板。
细胞膜
细胞壁的内侧紧贴着一层极薄的膜，叫做细胞膜（Cell Membrane）。这层由蛋白质分子和磷脂双分子层组成的薄膜，水和氧气等小分子物质能够自由通过，而某些离子和大分子物质则不能自由通过。
因此，它除了起着保护细胞内部的作用以外，还具有控制物质进出细胞的作用：既不让有用物质任意地渗出细胞，也不让有害物质轻易地进入细胞。此外，它能进行细胞间的信息交流。
细胞膜在光学显微镜下不易分辨。用电子显微镜观察，可以知道细胞膜主要由蛋白质分子和脂类分子构成。
在细胞膜的中间，是磷脂双分子层，这是细胞膜的基本骨架。在磷脂双分子层的外侧和内侧，有许多球形的蛋白质分子，它们以不同深度镶嵌在磷脂分子层中，或者覆盖在磷脂分子层的表面。
这些磷脂分子和蛋白质分子大都是可以流动的，可以说，细胞膜具有一定的流动性。细胞膜的这种结构特点，对于它完成各种生理功能是非常重要的。
流式-多聚甲醛
多聚甲醛固定，确实是老生长谈，很多研究生在做实验时，可能很多师兄师姐都让他们用多聚甲醛固定，有些可能是为了长时间保存样本，希望集中起来染色，有些可能是染色后排不上队，想保持长时间质量稳定。于是就这么口口相传下来了。那么，面对刚才@柠檬果秋秋 所提到的网上截然相反的两个观点，应该如何看待？
预固定问题
做科研或临床时，可能很多FLOWER习惯性都会用4％多聚甲醛预先固定标本，可能出于三个目的：（1）为了灭活标本里面可能存在的微生物（细菌、病毒等），起到安全保障作用。（2）希望标本能够较长时间存放（3）做胞内染色前的准备。但是，可能很多人忽视了一点，就是如果在染色之前用多聚甲醛固定标本，细胞表面有些位点在固定后构象发生改变，使得抗体无法结合产生假阴性，也可能由于固定作用，导致其它位点产生非特异性结合（假阳性）。
因此，知道哪些抗体染色前不能预固定，十分重要。幸好，我们自己不用做验证，在Biolegend公司网站上（），贴心的技术人员已经帮我们做了一系列测试，下面两张表，一张是人类抗原，一张是小鼠抗原，可以看的出来，大多数不能做预固定的抗体都是趋化因子受体，所以，大家在实验中千万要注意不要先固定后染色。
表1、4％多聚甲醛预固定对各种抗体表面染色的影响（人类），打勾的为允许预固定，打叉的表示预固定影响很大
表2、4％多聚甲醛预固定对各种抗体表面染色的影响（小鼠），打勾的为允许预固定，打叉的表示预固定影响很大
染色后固定问题
染色后的固定，就与抗原构象关系不大了，更多的是荧光素。以前4色以内的时候，用的荧光素都是非串联的，因此大多数影响不大，但随着各种新型串联染料的出现，多聚甲醛固定就成了问题了。
事实上，当你去搜索串联染色标记（如PE-cy7、APC-cy7等）的抗体时，会发现一些比较详细的描述里面会注明（以BD网站搜索APC-cy7各类抗体为例）：
Fixed cells should be yzed within 4 hours of fixation in paraformaldehyde or transferred to a paraformaldehyde-free buffer for overnight storage.
意思就是 用多聚甲醛固定过的样本，必须在4小时内检测，否则容易导致串联染料降解，若要长时间保存，还是需要洗涤后，转移到不含多聚甲醛的缓冲液中。
需要注意的是，做GFP荧光检测的同学，也需要注意一下，多聚甲醛固定也会影响GFP，New York Medical College的Paul A Lucas认为是由于多聚甲醛固定后，并非使GFP荧光淬灭，而是使GFP蛋白构象发生改变，无法产生荧光。有时候你固定后检测到的荧光可能是自发荧光，或剩余的未被改变构象的GFP发出的。
解决方案
1、如果检测的是前述表格中 容易被多聚甲醛影响的分子 ，请 尽量不要预固定 ，如需长期保存样本，可以考虑冻存单个核细胞。
2、如果检测的是前述表格中 不会受多聚甲醛影响的分子 ，可用 1％多聚甲醛 预固定保存，但FSC、SSC和荧光强度影响较大，如需避免此类缺点，可考虑流式中文网研发的 细胞保存液 （）。流式中文网的细胞保存液不含多聚甲醛，具有缓释轻柔的固定作用，故保存更长久，效果更佳，样本：保存液＝6：1～10：1，21～28天内检测均可获得良好的检测结果。
3、如果希望在染色后保持较长时间荧光稳定，仍首选建议： 避光、4度 ，在我们非正式的10色（BV405、KO、FITC、PE、ECD、PE-cy5.5、PE-cy7、APC、APC-A700、APC-cy7）流式检测时，曾经测过数例，在避光、4度保存24小时后，荧光强度几乎无变化，细胞分群良好。 如果仍不放心，可考虑购买商品化的适用于串联染料的专用固定剂。
总结：以上就是本站针对你的问题搜集整理的答案，希望对你有所帮助。